Plasmid Rekombinan untuk Produksi Protein Spike Mutan Severe Acute Respiratory Syndrome Coronavirus 2 (SARS-CoV-2)

Invensi ini berkaitan dengan desain dan konstruksi suatu vektor plasmid yang mengandung urutan nukleotida gen penyandi protein Spike mutan (D614G, Q677H) dari Severe Acute Respiratory Syndrome Coronavirus 2 (SARS-CoV-2). Urutan nukleotida gen penyandi protein Spike wildtype SARS-CoV-2 yang menginfeksi pasien Indonesia dari database Global Initiative on Sharing All Influenza Data (GISAID, accession number EPI_ISL_529961) dioptimasi preferensi kodonnya supaya sesuai untuk ekspresi di sel Escherichia coli serta dimodifikasi agar protein yang dihasilkan memiliki asam amino ke 614 berupa G dan asam amino ke 677 berupa H. Urutan nukleotida yang diperoleh kemudian diinsersikan ke vektor ekspresi E. coli yaitu pGex-4T-1 di antara sisi restriksi BamHI dan SalI. Plasmid rekombinan yang dihasilkan kemudian dinamakan pGex-S-mutan. Keberhasilan konstruksi pGex-S-mutan telah dikonfirmasi dengan sekuensing Sanger. Plasmid pGex-S-mutan apabila ditransformasikan ke sel E. coli dapat menghasilkan strain E. coli rekombinan yang dapat digunakan untuk produksi massal protein Spike mutan (D614G, Q677H) SARS-CoV-2 dalam bentuk terlarut dan mudah dipurifikasi.